Microbiología
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Item Caracterización de grumos extracelulares de Brucella abortus(2023) Vargas Moya, María Tiffany; Altamirano Silva, PamelaItem Descripción de los eventos post-replicativos asociados a la salida de Brucella abortus de células fagocíticas no profesionales HeLa(2023) Rojas Salas, María Paula; Altamirano Silva, PamelaItem Caracterización de dos aislamientos clínicos autóctonos de Naegleria fowleri: determinación de factores de virulencia y susceptibilidad a fármacos comerciales(2023) Chacón Camacho, Natalia; Abrahams Sandí, ElizabethItem Caracterización de la fitopatogenicidad de bacterias gram negativas aisladas de infecciones en plantas, mediante análisis fenotípico de la reacción de hipersensibilidad en Nicotiana tabacum y la detección molecular del gen efector hrpZ(2009) Herrera Cordero, Krisia; Uribe Lorío, LorenaLas bacterias fitopatógenas son microorganismos que causan enfennedades en plantas y prodncen anualmente cuantiosas pérdidas económicas. Entre los géneros más importantes como agentes causales de infecciones bacterianas en cultivos están: Envinia sp, Pseudomonas sp. y Xanthomonas sp. (Agrios, 2005). En el presente trabajo, se analizaron 127 cepas de bacterias gram negativas aisladas de lesiones de diversos cultivos, pertenecientes a la colección del laboratorio de Microbiología Ambiental del Centro de Investigaciones en Biología Celular y Molecular (CIBCM). Se optimizó la técnica de Reacción de Hipersensibilidad (RH) en plantas de Nicotiana tabacum, y se tamizó dicha colección, con el fin de diferenciar a las bacterias potencialmente fitopatógenas de las bacterias saprófitas. Para esta prneba, se determinó que la concentración adecuada para la suspensión bacteriana corresponde aproximadamente a 6 x 108 UFC/ml , utilizando un crecimiento bacteriano de 24 horas en el medio MP (Medio de Pectato liasa). Se probaron 3 protocolos de inoculación y se estableció que la técnica de impresión en hoja, permitió una adecuada inoculación en el mesófilo de la planta de tabaco. Un 15% de las bacterias (19 aislamientos), presentaron reacciones de hipersensibilidad típicas, un 65% (83 aislamientos) reacciones hipersensibilidad atípicas y 20% (25 aislamientos) presentaron resultados negativos. Con el fin de corroborar la patogenicidad de las bacterias que presentaron los resultados atípicos de la prueba de RH, se inoculó una suspensión de cada bacteria, aisladas inicialmente de lechugas y se observó que efectivamente desarrollaron la enfermedad en el hospedero. Por medio del método molecular de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), se intentó estandarizar la amplificación del gen hrpZ, que codifica por uno de los efectores que interviene en la reacción de hipersensibilidad...Item Prospección de la bacteria entomopatógena Bacillus thuringiensis en colonias de hormigas zompopas (géneros: Atta y Acromyrmex) para su potencial aplicación como agente de control biológico(2015) Cerdas Araya, José Fabián; Pinto Tomás, Adrián AlbertoBacillus thuringiensis es una bacteria ubicua que forma esporas y proteínas en forma de cristales, tóxicas para el aparato digestivo de los insectos. Se emplea ampliamente en el mundo como estrategia para control biológico de plagas. Una de las principales plagas del neótropico, donde se ubica Costa Rica, son las hormigas de la tribu Attini (Hymenoptera: Formicidae) de los géneros Atta y Acromyrmex, conocidas como zompopas. Estos insectos son responsables de pérdidas económicas muy importantes para la actividad agrícola debido a la gran cantidad de hojas de diferentes plantas que cortan para el mantenimiento de sus colonias. El presente trabajo de graduación evaluó la presencia de B. thuringiensis en nidos de hormigas zompopas de la especie Atta colombica en Costa Rica, con el fin de establecer estudios preliminares acerca de su patogenicidad. Se tomaron cuatro diferentes muestras de cada uno de los nidos escrutados: material de jardín fúngico de las cámaras de las hormigas, hormigas vivas que habitan estas cámaras, material del montículo de desecho de las hormigas y hormigas muertas que yacían en este montículo. Se recuperó con más frecuencia la bacteria en las muestras asociadas al basurero (57% y 76%) con respecto a las muestras del jardín fúngico (5% y 28%), con significancia estadística (Valor P: 0,0101). Además, mediante bioensayos de laboratorio se comprobó que las cepas aisladas presentaban toxicidad contra las hormigas. Estos resultados permiten concluir que los mecanismos de defensa de las hormigas, previamente descritos para otros patógenos, mantienen libre las cámaras del nido de hormigas de A. colombica de esta bacteria, lo cual brinda información adicional acerca de la ecología tanto de la bacteria como de las hormigas. Además, los bioensayos de laboratorio permitieron establecer una patogenicidad presuntiva de las cepas aisladas en miras de la posible el...Item Detección intracelular de las toxinas A y B en distintos genotipos de Clostridium difficile(2015) Jiménez Badilla, Iveth; Quesada Gómez, CarlosClostridium difficile es un bacilo Gram-positivo anaerobio con capacidad de formar esporas. Esta bacteria es el principal causante de diarrea nosocomial asociada al uso de antibióticos a nivel mundial. Sus principales factores de virulencia son las toxinas A y B (TcdA y TcdB), las cuales se encuentran codificadas en un locus de patogenicidad (PaLoc) junto con las proteínas TcdR, TcdC y TcdE, siendo esta última una proteína tipo holina que posiblemente facilita la secreción de TcdA y TcdB. En los últimos años se ha dado el surgimiento de cepas hipervirulentas de C. difficile, causantes de brotes epidémicos alrededor del mundo y caracterizadas como NAP1/027 por tipificación molecular. Estas cepas exhiben una mayor producción de TcdA y TcdB y expresan altos niveles de resistencia a fluoroquinolonas. El primer informe de brotes epidémicos por estas cepas en América Latina fue hecho en Costa Rica en el 2009, describiéndose además un nuevo genotipo llamado NAPCR1, similar a NAP1 pero sin sobreproducción de toxinas in vitro. El aislamiento y caracterización de cepas a partir de este brote ha permitido estudiar la actividad de las toxinas A y B secretadas por genotipos convencionales y genotipos posiblemente hipervirulentos. En este estudio fue posible realizar la detección por Western Blot de TcdA y TcdB a nivel intracelular de C. difficile en los genotipos NAP1, NAPCR1 y NAP4 en distintos tiempos de la curva de crecimiento, determinando además diferencias en la actividad citotóxica de los contenidos citoplasmáticos de los mismos sobre cultivo celular. Además, se estandarizó un método de Western Blot para la detección de TcdE. La cantidad de toxina A detectada en NAP1 fue mayor que en NAP4 y NAPCR1 a lo largo del tiempo, presentándose una señal fuerte desde las 4 horas. La toxina B solo fue detectada intracelularmente en NAP1 desde las 4 horas y hasta las 48 horas de crecimiento...